服務(wù)熱線(xiàn)
15502280048
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
目上常用的蛋白濃度檢測(cè)方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCAProteinAssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(BradfordProteinAssayKit)。改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結(jié)合成四配位基銅離子復(fù)合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色比色物,用分光光度法(酶標(biāo)儀或分光光度計(jì))檢測(cè)750nm處吸光度,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較,求得待測(cè)蛋白樣品的濃度,在1~1500μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線(xiàn)性關(guān)系。
組成:
產(chǎn)品名稱(chēng) | PD003-500T | PD003-1000T | Storage | ||
試劑(A):Folin-CiocalteuReagent | 5ml | 10ml | RT避光 | ||
試劑(B):改良LowryReagent | B1:LowryA | 100ml | 2×100ml | RT | |
B2:LowryB | 2ml | 4ml | RT | ||
B3:LowryC | 2ml | 4ml | RT | ||
臨用,按LowryA:B:C=50:1:1比例配制改良LowryReagent,即配即用。 | |||||
試劑(C):蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA,10mg/ml) | 1ml×2 | 4ml | -20°C | ||
試劑(D):蛋白標(biāo)準(zhǔn)稀釋液 | 2ml | 4ml | RT | ||
說(shuō)明書(shū) | 一份 | ||||
根據(jù)樣品數(shù)量按照試劑(A):Folin-CiocalteuReagent:ddH2O=1:1的比例配制工作液現(xiàn)配現(xiàn)用
儲(chǔ)存條件:
12個(gè)月有效。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒 操作步驟(僅供參考):
1、取適量10mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn),稀釋至終濃度為1500μg/ml或所需濃度。如取150μl 10mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn),加入850μl稀釋液,充分混勻,即配制1500μg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)。
2、根據(jù)樣品數(shù)量,按試劑(B1):試劑(B2):試劑(B3)=50:1:1的比例配制改良LowryReagent工作液,充分混勻。
3、將1500μg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)用稀釋待測(cè)樣品的溶液5倍梯度稀釋?zhuān)瑵舛确謩e為300μg/ml、60μg/ml、12.5μg/ml、2.5μg/ml、0μg/ml,各取40μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔。
4、加待測(cè)蛋白樣品或稀釋液(空白對(duì)照)到96孔板的樣品孔中,如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液不同,應(yīng)在待測(cè)蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液;如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液相同,無(wú)需在待測(cè)蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液。
5、用多通道微量移液器快速將200μl配置好的改良LowryReagent工作液加入至各孔,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動(dòng)輕輕混勻。室溫準(zhǔn)確孵育。
6、用多通道微量移液器快速將20μl新鮮配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動(dòng)輕輕混勻30s。
7、輕輕混勻96孔板,酶標(biāo)儀或微量滴定板讀數(shù)儀測(cè)定750nm處吸光度,也可用分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的小檢測(cè)體積,檢測(cè)樣品數(shù)量亦相應(yīng)減少。
注意事項(xiàng):
1、蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測(cè),該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃保存。
2、待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測(cè)蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測(cè)定不準(zhǔn)確。
3、如果沒(méi)有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的小檢測(cè)體積。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅供科研使用,嚴(yán)禁它用。
標(biāo)簽:蛋白定量試劑盒 試劑盒 本生試劑盒 試劑A
改良Lowry法蛋白定量試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生移液器吸頭
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